The role of nitric oxide in the inhibitory effects of exogenous hydrogen sulfide on rat colonic smooth muscle contraction

目的： 探讨一氧化氮（NO）在外源性硫化氢（H(2)S）抑制大鼠结肠动力中的作用。 方法： 免疫组化检测H(2)S合成酶胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）和胱硫醚-β-合成酶（CBS）在成年Wistar大鼠近端结肠的分布；制备近端结肠纵行肌（LM）和环形肌条（CM），通过恒温浴槽实验观察NO相关工具药干预后外源性H(2)S供体硫氢化钠（NaHS）对LM和CM收缩活动的影响；通过膜片钳实验检测不同浓度NaHS对平滑肌细胞L型钙通道电流（I(Ca，L)）的影响。 结果： H(2)S合成酶CBS和CSE在近端结肠肌间神经丛、黏膜层及环纵平滑肌细胞均表达。河豚毒素孵育肌条后NaHS以浓度依赖的方式抑制LM和CM自发性收缩活动，LM最大抑制的半数有效浓度（IC(50)）为917.6 μmol/L（95% CI：776.3~1 085 μmol/L，n=6），CM的IC(50)为730.4 μmol/L（95% CI：592.2~900.8 μmol/L，n=6）。NO供体硝普钠（SNP）预处理肌条后加入NaHS（3×10(-4)~6×10(-4)mol/L），LM及CM收缩幅度呈现双向变化，其中低浓度NaHS使LM收缩幅度从（0.679±0.181）g增加至（0.840±0.400）g（n=8，P<0.01），使CM收缩幅度从（0.378±0.140）g增加至（1.176.±0.056）g（n=8，P<0.01）。sGC抑制剂可溶性鸟苷酸环化酶抑制剂（sGC）ODQ孵育组NaHS的IC(50)高于对照组（P<0.05），而NO合成酶抑制剂L-NNA、NO前体L-精氨酸、环磷酸鸟苷（cGMP）竞争性拮抗剂PET-cGMP预处理肌条前后NaHS的IC(50)差异无统计学意义（P>0.05）。NaHS（100 μmol/L）使L型钙通道峰电流密度增加[（-4.29±0.29）比（-3.77±0.27）pA/pF，P<0.01]；而NaHS（300 μmol/L）使峰电流降低至（-2.96±0.34）pA/pF（P<0.05），并使电流-电压曲线右移。 结论： 外源性H(2)S对大鼠结肠动力可能具有双重调节作用，其中对结肠平滑肌的抑制作用不依赖NO；L型钙通道在H(2)S对结肠动力的双重调节作用中发挥重要作用。.